荆州市动物疫病预防控制中心非洲猪瘟专项监测检测试剂采购询价公告

序号

品种

参数与规格

单位

数量

备注

1

非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒

1. 作用与用途： 用于检测猪血清中非洲猪瘟病毒P30抗体。2．保存条件： 2~8℃保存

3.试剂盒规格：（1）96 孔/盒 （2）192 孔/盒 （3）480 孔/盒 4. 试剂盒组成：ASFV B抗原包被板 、ASFV B阴性血清、ASFV B阳性血清、ASFV 酶标抗体、 20×洗涤液、底物溶液 A、底物溶液 B、终止液5．结果判定：ASFV B 阴性对照血清的平均 OD 值即 OD NC ；ASFV B 阳性对照血清的平均 OD 值即 OD PC ；酶标抗体（空白）的平均 OD 值即 OD Cm ；待检样品的 OD 值即为 OD S ；阈值计算 阳性对照血清阻断率即 PB PC =100-OD PC /OD Cm ×100；阴性对照血清阻断率即 PB NC =100-OD NC /OD Cm ×100；样品阻断率即 PB S =100-OD S /OD Cm ×100。试验成立条件：PB NC ＜30 且 PB PC ＞70，试验结果有效；否则，重新进行试验。判定：在试验成立的前提下，样品阻断率即 PB S ＞50，结果判为阳性；PB S ≤50，结果判为阴性。6．试剂盒有效期15个月。7.****实验室提供技术支持8.中国动****中心提供技术支持。

盒

5

2板/盒

2

非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒

1．作用与用途：用于猪全血、血清、脾脏、淋巴结、肌肉等组织样品及粪便样品中非洲猪瘟病毒DNA的检测，适用于ASFV的检测、诊断和流行病学调查，对仪器设备要求较低，****实验室各种荧光PCR仪。2．贮藏与有效期：蛋白酶K、无菌无核酸酶水、PCR扩增反应液、实时荧光混合液、阳性对照和阴性对照-20℃以下保存，其他组分室温保存，有效期为9个月。3．敏感性：内控样本敏感性为100%，综合评价敏感性98%以上。4．特异性：特异性达到100%。5．稳定性：批内及批间差异≤3%。6．试剂盒规格：50头份/盒。7．试剂盒组成：消化液、DNA结合液、DNA洗涤液、DNA洗脱液、蛋白酶K、无菌无核酸酶水、PCR扩增反应液、实时荧光混合液、阳性对照、阴性对照、DNA吸附柱和收集管、说明书。8．反应程序为：95℃预变性2分钟；95℃变性5秒，58℃退火延伸15秒，共40个循环，荧光收集设置在每次循环的退火延伸结束时进行（报告基团“FAM”，淬灭基团“NONE”）。9．反应体系为20μL。10．结果判定：（1）结果分析条件设定阈值设定原则：阈值线超过阴性对照扩增曲线的最高点，且相交于阳性对照扩增曲线进入指数增长期的拐点，或根据仪器噪声情况进行调整。每个样品反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数即为Ct值。（2）结果成立条件：阳性对照Ct值＜30并出现特异的扩增曲线，阴性对照无Ct值且无特异的扩增曲线，试验结果成立。（3）结果判定被检样品Ct值≤35并出现特异的扩增曲线，判为非洲猪瘟病毒核酸阳性。

被检样品无Ct值或Ct值≥40且无特异的扩增曲线，判为非洲猪瘟病毒核酸阴性。

被检样品35＜Ct值＜40并出现特异的扩增曲线，判为非洲猪瘟病毒核酸疑似，对疑似样品，需重新取样提取DNA，按双倍模板量（即2μl DNA）进行复检，Ct值＜40并出现特异的扩增曲线判为阳性，否则判为阴性。11．实验质控：阴性对照和阳性对照必须提取核酸后再扩增。12.所有产品均在动物疫病诊断生物制品GMP车间分子生物学类诊断制品生产线生产，质量稳定。获得农业部颁发新兽药注册证书。有正式有效的农业农村部批准文号，且严格按照《中华人民**国生物制品生产规程》生产制备，质量符合农业农村部部颁标准。连续2次通过农业农村部组织的非洲猪瘟试剂比对，产品列入****控制中心《关于公布第一批非洲猪瘟现场快速检测试剂评价结果的通知》【疫控（诊）[2019]3号】文件和《关于公布非洲猪瘟现场快速检测试剂名单的通知》【疫控（诊）[2019]74号】文件。****政府采购项目，**范围使用，效果良好。

盒

10

50T/盒

3

非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒

1. 作用与用途： 用于全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肺脏、肌肉、血粉、环境样品等样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。2．保存条件：-20℃以下冷冻保存。3．试剂盒规格：50 检份/盒。4. 试剂盒组成：荧光PCR酶混合液900μl/管、引物探针、阳性对照100μl/管、阴性对照100μl/管。5.敏感性100%，特异性100%

6．反应程序：50℃孵育 2 分钟，95℃预变性 5 分钟；95℃变性 15 秒，60℃退火延伸 1 分钟，45 个循环，在每一循环的 60℃时收集 FAM 荧光信号。 7.结果判定 （1）阳性对照 Ct值应＜30且出现特异性扩增曲线，阴性对照应无Ct值且Ct值≥ 40且无特异性扩增曲线，阴性对照应无 Ct值或 Ct值≥ 40且 无特异性扩增曲线，试验结果有效；否则应重新进行。（2）被检样品 Ct 值≤38 且出现特异性扩增曲线，判为阳性；当无 Ct 值或 Ct 值≥40， 判为阴性；当 38＜Ct 值＜40 且出现特异性扩增曲线，判为疑似。对疑似样品，模板量加倍（4μl）进行复检 2 次，有 1 次出现 Ct 值＜40 且出现特异性扩增曲线即判为阳性，否则判为阴性。8．试剂盒有效期12个月。9．****实验室提供技术支持。10.中国动****中心提供技术支持。11.具有兽药批准文号。

盒

30

50T/盒

4

非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒

样品裂解液：1.5ml/管×2 管或 1.5ml/管×4 管

PCR 反应液：950μl/管×1 管或 950μl/管×2 管。DNA 酶混合液：50μl/管×1 管或 100μl/管×1 管。阳性对照：100μl/管×1 管或 200μl/管×1 管。阴性对照：100μl/管×1 管或 200μl/管×1 管。内标：50μl/管×1 。

盒

10

50T/盒

5

非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒

1.试剂盒含实时荧光PCR检测扩增试剂，扩增试剂-20℃保存。2.试剂盒反应液为一管式，无需单独配制。3.反应程序为：95℃预变性3min，95℃变性10s，60℃退火延伸20s，在每个循环第二步（60℃ 20s）收集荧光信号，共40个循环。（报告基团“FAM”）。4.试剂盒有效期10个月以上。

5.反应体系为25μL，阴性对照和阳性对照不用提取可以直接扩增。6.生产厂家具有兽药诊断制品GMP证书和生产许可证。7.所投产品具有批准文号，需提供厂家盖章的复印件。

盒

10

50T/盒

6

非洲猪瘟P72基因、CD2基因MGF360-505R基因三重实时荧光PCR检测试剂盒

1．用途：本试剂盒采用实时荧光PCR方法鉴别猪全血、口鼻拭子、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、肝脏、扁桃体、肺、肌肉等样品及环境样品中的P72、CD2V和MGF 360-505R基因。对仪器设备要求较低，****实验室各种荧光PCR仪。

2．保存及有效期：所有试剂应-20℃保存；有效期12个月。3.敏感性：敏感性达到98%以上。

4.特异性：特异性达到100%。5．稳定性：批内及批间差异≤3%。6．试剂盒规格：50头份/盒。

7．试剂盒组成：阴性对照、阳性对照、PCR反应液、荧光探针、说明书。8．反应程序为94 ℃ 30s；循环94 ℃ 5 s，60 ℃ 34 s，共40次，每次循环的第二步（60 ℃ 34 s）收集荧光信号。

9．反应体系为25μL。10．结果判定：

（1）结果分析条件设定：阈值设定原则：阈值线设定于刚好超过阴性对照扩增曲线的最高点。不同仪器可根据仪器噪音情况进行调整。（2）结果描述及判定：阳性对照P72、CD2v、MGF 360-505R基因的Ct值均＜35且出现特异性扩增曲线，阴性对照均无Ct值或Ct值≥40且无特异性扩增曲线，判为试验有效。被检样品FAM荧光信号Ct值≤38，并出现特异性扩增曲线为P72基因阳性，无Ct值或Ct值≥40，判为 P72基因检测阴性。VIC荧光信号Ct值≤38，并出现特异性扩增曲线为CD2V基因阳性；无Ct值或Ct值≥40，判为 CD2v基因检测阴性。ROX荧光信号Ct值≤38，并出现特异性扩增曲线为MGF 360-505R基因阳性；无Ct值或Ct值≥40，判为 MGF 360-505R基因阴性。被检样品FAM或VIC或ROX荧光信号38＜Ct＜40，并出现特异性扩增曲线，判为疑似。对疑似样品，再进行1次复检，做3个重复扩增后进行结果判定，至少2个重复Ct值＜40且出现特异性扩增曲线即判为阳性，否则判为检测阴性。对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，应判定为阴性。11．实验质控：阴性对照和阳性对照必须提取核酸后再扩增。12.所有产品均在动物疫病诊断生物制品GMP车间分子生物学类诊断制品生产线生产，质量稳定。

盒

3

50T/盒

7

非洲猪瘟P72基因、CD2基因MGF360-505R基因三重实时荧光PCR检测试剂盒

1. 作用与用途：用于全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肌肉、唾液、精液、口鼻拭子、肛拭子和环境拭子等样品中的非洲猪瘟病毒P72基因、CD2v基因和MGF 505-1R基因的检测。

2．保存条件：-20℃以下冷冻保存，有效期为 15个月。3．试剂盒规格：50 检份/盒4. 试剂盒组成：酶反应液1000μl/管、引物探针 1 管、阳性对照 500μl/管、阴性对照500μl/管。"5．PCR 反应 加样后将PCR反应管瞬时离心，然后置于荧光PCR仪内，进行如下反应：37℃孵育2分钟；95℃预变性20秒；95℃变性10秒，60℃延伸30秒，共40个循环；设置60℃收集FAM、VIC与Cy5荧光信号。"6.结果判定：（1） 非洲猪瘟病毒P72基因FAM信号通道下，当样品的扩增结果有典型的扩增曲线且Ct值＜37时，判定为非洲猪瘟病毒P72基因阳性。当样品的扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，可初步判定为非洲猪瘟病毒P72基因阴性；当样品的扩增结果有典型的扩增曲线且37≤Ct值＜40时，可初步判定为非洲猪瘟病毒P72基因可疑；对初步判定阴性样品或可疑样品应再进行1次复检，做3个重复反应，若1、2或3个重复反应的Ct值＜40，且出现典型的扩增曲线，最终判定为非洲猪瘟病毒P72基因阳性，扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，最终判定为非洲猪瘟病毒P72基因阴性。

（2） 非洲猪瘟病毒CD2v基因VIC信号通道下样品的扩增结果有典型的扩增曲线且Ct 值＜37时，判定为非洲猪瘟病毒CD2v基因阳性。当样品的扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，可初步判定为非洲猪瘟病毒CD2v基因阴性；当样品的扩增结果有典型的扩增曲线且37≤Ct值＜40时，可初步判定为非洲猪瘟病毒CD2v基因可疑；对初步判定阴性样品或可疑样品应再进行1次复检，做3个重复反应，若1、2或3个重复反应的Ct值＜40，且出现典型的扩增曲线，最终判定为非洲猪瘟病毒CD2v基因阳性，扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，最终判定为非洲猪瘟病毒CD2v基因阴性。 （3）非洲猪瘟病毒MGF基因Cy5信号通道下样品的扩增结果有典型的扩增曲线且Ct 值＜37时，判定为非洲猪瘟病毒MGF基因阳性。当样品的扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，可初步判定为非洲猪瘟病毒MGF基因阴性；当样品的扩增结果有典型的扩增曲线且37≤Ct值＜40时，可初步判定为非洲猪瘟病毒MGF基因可疑；对初步判定阴性样品或可疑样品应再进行1次复检，做3个重复反应，若1、2或3个重复反应的Ct值＜40，且出现典型的扩增曲线，最终判定为非洲猪瘟病毒MGF基因阳性，扩增结果无Ct值或无典型的扩增曲线时，最终判定为非洲猪瘟病毒MGF基因阴性。"7．试剂盒有效期12个月。

8．****实验室提供技术支持。9.中国动****中心提供技术支持。10.具有兽药批准文号。

盒

3

50T/盒

8

非洲猪瘟与非洲猪瘟177L株缺失株鉴别检测试剂（双重荧光PCE发)

1、作用与用途：用于全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、肌肉、粪便等样品中的非洲猪瘟病毒和缺失I177L非洲猪瘟病毒DNA的鉴别检测。2、规格：50反应/盒。3、荧光定量 PCR 反应液，1140 μl×2 、荧光定量 PCR 酶混合液，120 μl、非瘟双重qPCR 引物探针，300 μl 、非瘟双重 qPCR 阳性对照，100 μl 、非瘟双重 PCR 阴性对照，1000 μl。4、贮存与有效期：-20℃保存；有效期为12个月。 1、投标人有《兽药生产许可证》和《兽药GMP证书》。2、投标人具有《高致病****实验室资格证书》；3、投标人具有ISO9001：2015质量管理体系认证证书。4、该产****实验室参与研制生产。

盒

2

50份/盒

9

核酸提取试剂（磁珠）

1、适用于Smart32、Stream SP96等自动化提取仪；2、适用于血液样本、分泌物样本、脱落细胞样本、骨髓样本、尿液样本等核酸提取; 3、批内和批间CV值小于5%；

盒

50

32T/盒