智慧城基因工程模式动物研发项目

审批
湖北-鄂州
发布时间: 2025年07月04日
项目详情
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1、建设项目基本信息
企业基本信息
建设单位名称: 建设单位代码类型: 建设单位机构代码: 建设单位法人: 建设单位联系人: 建设单位所在行政区划: 建设单位详细地址:
****
****0700MA49JKP50A黄子午
黄总**省鄂****开发区
****开发区**高新智慧城 2 期 11 栋厂房
建设项目基本信息
项目名称: 项目代码: 项目类型: 建设性质: 行业类别(分类管理名录): 行业类别(国民经济代码): 工程性质: 建设地点: 中心坐标: ****机关: 环评文件类型: 环评批复时间: 环评审批文号: 本工程排污许可证编号: 排污许可批准时间: 项目实际总投资(万元): 项目实际环保投资(万元): 运营单位名称: 运营单位组织机构代码: 验收监测(调查)报告编制机构名称: 验收监测(调查)报告编制机构代码: 验收监测单位: 验收监测单位组织机构代码: 竣工时间: 调试起始时间: 调试结束时间: 验收报告公开起始时间: 验收报告公开结束时间: 验收报告公开形式: 验收报告公开载体:
智慧城基因工程模式动物研发项目
2018版本:107-专业实验室M7340-M7340-医学研究和试验发展
**省鄂****开发区 ****开发区**高新智慧城 2 期 11 栋厂房
经度:****911.933 纬度: 303043.472****审批局
2023-04-25
鄂葛审〔2023〕32号****
2021-05-062000
2000****
****0700MA49JKP50A****
****0700MA49JKP50A**钟****公司
****0881MA49AGNB7C2024-10-18
2025-06-032025-07-03
https://www.js-eia.cn/
2、工程变动信息
项目性质
环评文件及批复要求: 实际建设情况: 变动情况及原因: 是否属于重大变动: 是否重新报批环境影响报告书(表)文件:
****
规模
环评文件及批复要求: 实际建设情况: 变动情况及原因: 是否属于重大变动: 是否重新报批环境影响报告书(表)文件:
年微生物检测800个样本,检测所需的试剂(蛋白试剂、抗体试剂等)小鼠基因型鉴定试剂盒100套、TBE10L、DNA Marker100份、年试验特定疾病小白鼠 5000只年微生物检测800个样本,检测所需的试剂(蛋白试剂、抗体试剂等)小鼠基因型鉴定试剂盒100套、TBE10L、DNA Marker100份、年试验特定疾病小白鼠 5000只
生产工艺
环评文件及批复要求: 实际建设情况: 变动情况及原因: 是否属于重大变动: 是否重新报批环境影响报告书(表)文件:
(1)检测区实验流程(P2 ****实验室) ①样品采集和处理 A 、透明胶带法皮肤被毛采样:将透明胶带剪成与载玻片近等长的胶条,贴于载玻片上,将其一端胶面相对反折约 0.5cm(便于揭拉)。用时拉住重叠部分揭开胶带(使其另 一端仍粘在载玻片上),在带检动物的易感部位依次按压,并逆毛向用力粘取,拔下少许被毛为宜。然后将胶带复位于载玻片上,不要留有气泡或者褶皱,编号待检。 B 、透明胶带法肛周采样:将 5cm*2.5cm 的透明胶带粘在载玻片上,将其一端胶面相对反折约 0.5cm(便于揭拉)。检查时揭下胶带在动物肛门周围粘取数次,再将其复位于载玻片上,不要留有气泡或者褶皱,编号待检。 C 、拔毛采样:用镊子在实验动物易感部位分别拔取少许被毛,散放于载玻片上,用透明胶带压住(或加一滴生理盐水后,覆以盖玻片),编号待检。 D 、盲肠内容物采样:沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部及颈部的肌肉全部暴露。取灭菌眼科镊子和眼科剪各一把,剪开腹部肌肉,暴露回盲部。剪开回盲部,用灭菌接种环挑取适量的内容物划线接种于琼脂平皿,挑取约 1/10 量的内容物接种 增菌液,如内容物不足量,可剪下包括回盲部在内的一段肠组织,适当剪碎后放入增菌液。 同时于载玻片上滴加 1 滴生理盐水,挑取新鲜盲肠内容物,与生理盐水混合涂制成薄而均 匀的粪膜,盖上盖玻片后编号待检。 E 、呼吸道内容物采样:沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部及颈部的肌肉全部暴露。取灭菌眼科镊子和眼科剪各一把,分离颈部肌肉直到暴露气管,于咽部以下 5mm左右将气管剪一“V”形口,用无菌接种针插入气管,由下朝上达到咽部轻轻转动几下。将沾有气管分泌物的接种针在琼脂平皿上进行划线接种。如需接种增菌液培养,则可将咽喉部及部分气管剪下投入培养液。 F 、心脏采血:麻醉后,将左侧心脏部用75%酒精消毒。用左手触摸心脏跳动处,右 手持注射器选择心搏最强处刺入,上下垂直拉动注射器至明显有血液涌出,然后将注射器 的针头拔下,将血液缓慢注射到PCR 离心管中保存并编号,然后放置离心机中在4000R/min 下离心 10min ,每个离心管中取 18 次 5um 的上清液保存起来备用并编号。 G 、股静脉采血:动物固定后,剪去采血部位的毛,用 75%乙醇消毒局部皮肤,用胶 带绑在股部,或由助手用手握紧股部,即可明显见到充血静脉,右手持注射器,将针头向 血管旁的皮下先刺入,而后与血管平行的方向刺入静脉,由股静脉下端向心方向刺入。见 回血后,放松对静脉近心端的压迫,徐徐抽动针筒即可取血。取血后用棉球压迫止血。 ②寄生虫、细菌、病毒检测 A 、细菌检测:从采样室取走细菌待检样品送入细菌检测室,将样品放入培养箱中进 行培养。然后观察培养基上的菌落形态,再进行生化试验,检测样品的阳性情况。 生化试验流程具体如下: a1 、菌悬液的制备:在 1.5mlEP 管中先用移液枪加 100ul 的无菌生理盐水,用接种环 挑取 TSI 琼脂斜面上单个菌落利用生理盐水反复均匀地涂抹在管壁上,再加入 900ul的生理盐水摇匀,盖上盖子并编号备用。 a2、靛基质(蛋白胨水)生化管中用移液枪加50ul 菌悬液用封口膜将安培瓶的瓶口封住放入 37℃恒温培养箱中培养 24h 后拿出,再向其中滴加 Kovacs 试剂 2—3d 滴,有红色环为阳性、黄色环为阴性。 a3、尿素酶琼脂斜面上用接种针挑取单菌落的部分穿刺接种后拧紧盖子放入37℃恒温 培养箱中培养24h后拿出,颜色变成玫瑰红色为阳性,黄色为阴性。 a4 、取赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、氨基酸脱羧酶对照生化管用移液枪各加50ul菌悬液,再各滴加1ml无菌石蜡油将安培瓶内的液体口封好放入37℃恒温培养箱中培养24h后拿出,首先氨基酸脱羧酶对照组为黄色实验才有效,颜色变紫色为阳性变黄色为阴性。 a5 、葡萄糖、木糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖生化管中用移液枪各加50ul 菌悬液用封口膜 将安培瓶的瓶口封好放入37℃恒温培养箱中培养 24h 后拿出,颜色变黄为阳性,颜色不变 或者蓝绿色为阴性。 a6、明胶液化生化管中用移液枪加 50ul 菌悬液用封口膜将安培瓶的瓶口封住放入 37℃ 恒温培养箱中培养24h 后拿出(一般培养 1-2 天),然后放置4℃冰箱中30min后拿出,凝固为阴性,液化为阳性。 a7、三糖铁琼脂上用接种针挑取单菌落的部分穿刺接种后拧紧盖子放入 37℃恒温培养 箱中培养 24h 后拿出,底层变黑为硫化氢阳性,其他颜色为阴性。 B 、寄生虫检测:从采样室取走寄生虫待检样品送入寄生虫检测室,将样品放在显微镜下观察,看样品是否出现成虫或虫卵。 C 、血清学检测(病毒检测):从采样室取走血清待检样品进入血清学检测室,将待检血清用ELISA 试剂盒进行检测,观察微孔的颜色变化及记录好酶标仪的 OD 值来判断是否为阳性。 ELISA 试剂盒检测流程具体如下: c1 、稀释样品:将待检血清按序排列在 PCR 板上,用10ul 的移液枪在1.5ml的 PCR管内按序加入 5ul 的相应待检血清,再在每管内各加入245ul 的样本稀释液,混匀。 c2 、加样:每次实验都应设置阳性对照、阴性对照和空白对照各一组,在阴性阳性对 照孔内各100ul 的阴性阳性样品,空白对照孔内各加100ul 的样本稀释液。然后再在“+”和 “-”一次加入 100ul 稀释过的血清样本。加完后,贴上封板膜,放置 37℃恒温培养箱中孵育45分钟。 c3 、洗涤:小心揭掉封板膜,用洗涤液洗涤 5 次,晾干。 c4 、酶标试剂:每孔加入 100ul 的酶标试剂,贴上封板膜,置 37℃恒温培养箱中孵育 45 分钟。 c5 、洗涤:小心揭掉封板膜,用洗涤液洗涤 5 次,拍干。 c6 、显色剂:每孔加入 100ul 的显色剂,置室温(20-25℃) 显色 30 分钟。 c7 、读数:反应完毕后立即用酶标仪读数(波长 405nm),每个样本的△OD 值为其 抗原孔与参照细胞孔读数的差值。 c8、终止:若反应完毕后不能立即用酶标仪读数,应在每孔内加入 25ul 的终止液并混 匀,在 15 分钟内完成读数。 ****实验室的检测过程中会产生废气(实验有机废气、实验微生物气溶胶)、 废水(实验器具清洗废水、地面清洁废水、实验纯水制备废水、实验高温灭菌废水、员工 办公废水、工衣清洗废水)、噪声(实验设备噪声)、固废(实验动物尸体(包括器官、 组织等)、实验废一次性耗材、实验废液、实验纯水制备废 RO 膜、废 HEPA 过滤器、实 验废样本、实验废培养基、实验器具首次清洗及二次清洗废水)。 (2)研发****实验室) ①小鼠基因型鉴定试剂盒研发 A、裂解液储存温度测试:裂解液储存温度低温保存的裂解液会有结晶析出,37℃水浴加热结晶会重新溶解,所以需测试低温保存的裂解液对提取的 DNA 效果有无影响。每批可随机选择几个品系多份,一份用正常的室温保存的裂解液进行消化,另一份用 4℃保存的裂解液进行消化,最终的PCR 产物电泳后进行对比,进行五次左右测试以确定不同储存温度对裂解液效果的影响。 B 、消化时间测试:烘箱 55℃****实验室目前所采用的样本消化方法。需查阅资料掌握 55℃过夜消化的原理,对过夜消化的具体时间应进行测试,如 4 小时,6 小时, 8 小时,10 小时,12 小时。每批可随机选择几个品系多份,烘箱 55℃分别消化 4 、6 、8、 10 、12 小时,最终的 PCR 产物电泳后进行对比,进行五次左右测试以确定烘箱 55℃消化 的最优时间。 C 、PCR 模板 DNA 浓度测试:****实验室提取 DNA 实际情况在 PCR 时 进行不同浓度测试,从而得到最适模板 DNA 浓度。 D 、扩增条带大小测试:实验室目前所用提取 DNA 方法最高可扩增出 1000bp 大小的 条带,所以需测试更大条带是否也可以用这种方法进行,如实验室内部可设计 2000bp 左 右条带的引物,进行 PCR 扩增,看最终是否有扩增产物,如此进行 5 次左右测试,以提高 基因型鉴定试剂盒的 PCR 扩增产物的大小。 E 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ②TBE 研发 A.DNA 的琼脂糖凝胶电泳测试:TBE 缓冲液是生物学中常使用的核酸电泳缓冲盐溶 液,主要用于 DNA 的琼脂糖凝胶电泳。TBE 的主要成分是 Tris-硼酸盐与 EDTA,缓冲能 力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于 1kb 的片段时分离效果好。按不同比例 调配 Tris-硼酸盐、EDTA ,形成不同配方的 TBE 缓冲液,然后进行 DNA 的琼脂糖凝胶电 泳测试。 B 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ③DNA Marker 研发 A 、引物设计:设计阳性细菌或病毒不同大小条带引物,如 100bp,200bp ,300bp 等, 设计完成的引物验证其是否可用。 B 、克隆:对不同阳性核酸进行克隆,并对克隆产物进行蓝白斑筛选,挑出单一白色菌落进行冻存,同时PCR检测克隆是否成功。 C 、阳性核酸 PCR 产物的混合及浓度调整:将克隆成功的阳性核酸的电泳产物混合到一起,各组分调整至合适浓度,以使混合液的电泳条带呈现出单一明亮均匀的条带。 D 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ****实验室的研发过程中会产生废气(实验有机废气)、废水(实验器具清洗废水、地面清洁废水、实验纯水制备废水、实验高温灭菌废水、员工办公废水、工衣清洗废水)、噪声(实验设备噪声)、固废(实验动物尸体包括器官、组织等)、实验废一次性耗材、实验废液、实验纯水制备废RO膜、实验废培养基、实验器具首次清洗及二次清洗废水)。 (3)体外培育试验区体外培育试验流程(普通试验区) ①特定疾病小白鼠(原料)外购及饲养:根据体外培育试验的需求购买的特定疾病小白鼠,该特定疾病具有遗传性和非传染性,经过基****实验室进行)、微生****实验室进行)合格后,分笼饲养在特定疾病小白鼠暂存区,特定疾病小白鼠暂存区的饲养环境为屏障环境(符合国家标准:GB14928-2010 实验动物环境及设施),其环境温度在 20-26℃ , 湿度在 40%~70% ,所有小白鼠均饲养在屏障设备内的独立通风饲 养系统(IVC)中。特定疾病小白鼠(原料)的饲养周期约为 60d ,平均每批次饲养约 822 只,一年饲养 5000 只。 ②特定疾病小白鼠体外培育试验:在不同培育条件下,将特定疾病小白鼠(原料)在 体外受精,将受精卵注入分笼饲养在体外培育试验区的健康母鼠(原料)体内(在体外培 育试验区的 IVF 间、操作间进行),使健康母鼠(原料)受孕并产下特定疾病小白鼠后代, 将健康母鼠(原料)产下的特定疾病小白鼠后代分笼饲养在体外培育试验区,并定期对特 定疾病小白鼠后代进行基****实验室进行)、微生****实验室 进行),经过不断的繁育及筛选,得到符合试验要求的特定疾病小白鼠后代。体外培育试验区的饲养环境为屏障环境(符合国家标准:GB14928-2010 实验动物环境及设施),其 环境温度在 20-26℃ , 湿度在 40%~70% ,所有小白鼠均饲养在屏障设备内的独立通风饲养 系统(IVC)中。健康母鼠(原料)、特定疾病小白鼠后代的饲养周期均约为 60d ,健康 母鼠(原料)平均每批次饲养约 3288 只、特定疾病小白鼠后代平均每批次饲养约 28768 只,一年饲养健康母鼠(原料)20000 只、一年饲养特定疾病小白鼠后代 175000 只。(1)检测区实验流程(P2 ****实验室) ①样品采集和处理 A 、透明胶带法皮肤被毛采样:将透明胶带剪成与载玻片近等长的胶条,贴于载玻片上,将其一端胶面相对反折约 0.5cm(便于揭拉)。用时拉住重叠部分揭开胶带(使其另 一端仍粘在载玻片上),在带检动物的易感部位依次按压,并逆毛向用力粘取,拔下少许被毛为宜。然后将胶带复位于载玻片上,不要留有气泡或者褶皱,编号待检。 B 、透明胶带法肛周采样:将 5cm*2.5cm 的透明胶带粘在载玻片上,将其一端胶面相对反折约 0.5cm(便于揭拉)。检查时揭下胶带在动物肛门周围粘取数次,再将其复位于载玻片上,不要留有气泡或者褶皱,编号待检。 C 、拔毛采样:用镊子在实验动物易感部位分别拔取少许被毛,散放于载玻片上,用透明胶带压住(或加一滴生理盐水后,覆以盖玻片),编号待检。 D 、盲肠内容物采样:沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部及颈部的肌肉全部暴露。取灭菌眼科镊子和眼科剪各一把,剪开腹部肌肉,暴露回盲部。剪开回盲部,用灭菌接种环挑取适量的内容物划线接种于琼脂平皿,挑取约 1/10 量的内容物接种 增菌液,如内容物不足量,可剪下包括回盲部在内的一段肠组织,适当剪碎后放入增菌液。 同时于载玻片上滴加 1 滴生理盐水,挑取新鲜盲肠内容物,与生理盐水混合涂制成薄而均 匀的粪膜,盖上盖玻片后编号待检。 E 、呼吸道内容物采样:沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部及颈部的肌肉全部暴露。取灭菌眼科镊子和眼科剪各一把,分离颈部肌肉直到暴露气管,于咽部以下 5mm左右将气管剪一“V”形口,用无菌接种针插入气管,由下朝上达到咽部轻轻转动几下。将沾有气管分泌物的接种针在琼脂平皿上进行划线接种。如需接种增菌液培养,则可将咽喉部及部分气管剪下投入培养液。 F 、心脏采血:麻醉后,将左侧心脏部用75%酒精消毒。用左手触摸心脏跳动处,右 手持注射器选择心搏最强处刺入,上下垂直拉动注射器至明显有血液涌出,然后将注射器 的针头拔下,将血液缓慢注射到PCR 离心管中保存并编号,然后放置离心机中在4000R/min 下离心 10min ,每个离心管中取 18 次 5um 的上清液保存起来备用并编号。 G 、股静脉采血:动物固定后,剪去采血部位的毛,用 75%乙醇消毒局部皮肤,用胶 带绑在股部,或由助手用手握紧股部,即可明显见到充血静脉,右手持注射器,将针头向 血管旁的皮下先刺入,而后与血管平行的方向刺入静脉,由股静脉下端向心方向刺入。见 回血后,放松对静脉近心端的压迫,徐徐抽动针筒即可取血。取血后用棉球压迫止血。 ②寄生虫、细菌、病毒检测 A 、细菌检测:从采样室取走细菌待检样品送入细菌检测室,将样品放入培养箱中进 行培养。然后观察培养基上的菌落形态,再进行生化试验,检测样品的阳性情况。 生化试验流程具体如下: a1 、菌悬液的制备:在 1.5mlEP 管中先用移液枪加 100ul 的无菌生理盐水,用接种环 挑取 TSI 琼脂斜面上单个菌落利用生理盐水反复均匀地涂抹在管壁上,再加入 900ul的生理盐水摇匀,盖上盖子并编号备用。 a2、靛基质(蛋白胨水)生化管中用移液枪加50ul 菌悬液用封口膜将安培瓶的瓶口封住放入 37℃恒温培养箱中培养 24h 后拿出,再向其中滴加 Kovacs 试剂 2—3d 滴,有红色环为阳性、黄色环为阴性。 a3、尿素酶琼脂斜面上用接种针挑取单菌落的部分穿刺接种后拧紧盖子放入37℃恒温 培养箱中培养24h后拿出,颜色变成玫瑰红色为阳性,黄色为阴性。 a4 、取赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、氨基酸脱羧酶对照生化管用移液枪各加50ul菌悬液,再各滴加1ml无菌石蜡油将安培瓶内的液体口封好放入37℃恒温培养箱中培养24h后拿出,首先氨基酸脱羧酶对照组为黄色实验才有效,颜色变紫色为阳性变黄色为阴性。 a5 、葡萄糖、木糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖生化管中用移液枪各加50ul 菌悬液用封口膜 将安培瓶的瓶口封好放入37℃恒温培养箱中培养 24h 后拿出,颜色变黄为阳性,颜色不变 或者蓝绿色为阴性。 a6、明胶液化生化管中用移液枪加 50ul 菌悬液用封口膜将安培瓶的瓶口封住放入 37℃ 恒温培养箱中培养24h 后拿出(一般培养 1-2 天),然后放置4℃冰箱中30min后拿出,凝固为阴性,液化为阳性。 a7、三糖铁琼脂上用接种针挑取单菌落的部分穿刺接种后拧紧盖子放入 37℃恒温培养 箱中培养 24h 后拿出,底层变黑为硫化氢阳性,其他颜色为阴性。 B 、寄生虫检测:从采样室取走寄生虫待检样品送入寄生虫检测室,将样品放在显微镜下观察,看样品是否出现成虫或虫卵。 C 、血清学检测(病毒检测):从采样室取走血清待检样品进入血清学检测室,将待检血清用ELISA 试剂盒进行检测,观察微孔的颜色变化及记录好酶标仪的 OD 值来判断是否为阳性。 ELISA 试剂盒检测流程具体如下: c1 、稀释样品:将待检血清按序排列在 PCR 板上,用10ul 的移液枪在1.5ml的 PCR管内按序加入 5ul 的相应待检血清,再在每管内各加入245ul 的样本稀释液,混匀。 c2 、加样:每次实验都应设置阳性对照、阴性对照和空白对照各一组,在阴性阳性对 照孔内各100ul 的阴性阳性样品,空白对照孔内各加100ul 的样本稀释液。然后再在“+”和 “-”一次加入 100ul 稀释过的血清样本。加完后,贴上封板膜,放置 37℃恒温培养箱中孵育45分钟。 c3 、洗涤:小心揭掉封板膜,用洗涤液洗涤 5 次,晾干。 c4 、酶标试剂:每孔加入 100ul 的酶标试剂,贴上封板膜,置 37℃恒温培养箱中孵育 45 分钟。 c5 、洗涤:小心揭掉封板膜,用洗涤液洗涤 5 次,拍干。 c6 、显色剂:每孔加入 100ul 的显色剂,置室温(20-25℃) 显色 30 分钟。 c7 、读数:反应完毕后立即用酶标仪读数(波长 405nm),每个样本的△OD 值为其 抗原孔与参照细胞孔读数的差值。 c8、终止:若反应完毕后不能立即用酶标仪读数,应在每孔内加入 25ul 的终止液并混 匀,在 15 分钟内完成读数。 ****实验室的检测过程中会产生废气(实验有机废气、实验微生物气溶胶)、 废水(实验器具清洗废水、地面清洁废水、实验纯水制备废水、实验高温灭菌废水、员工 办公废水、工衣清洗废水)、噪声(实验设备噪声)、固废(实验动物尸体(包括器官、 组织等)、实验废一次性耗材、实验废液、实验纯水制备废 RO 膜、废 HEPA 过滤器、实 验废样本、实验废培养基、实验器具首次清洗及二次清洗废水)。 (2)研发****实验室) ①小鼠基因型鉴定试剂盒研发 A、裂解液储存温度测试:裂解液储存温度低温保存的裂解液会有结晶析出,37℃水浴加热结晶会重新溶解,所以需测试低温保存的裂解液对提取的 DNA 效果有无影响。每批可随机选择几个品系多份,一份用正常的室温保存的裂解液进行消化,另一份用 4℃保存的裂解液进行消化,最终的PCR 产物电泳后进行对比,进行五次左右测试以确定不同储存温度对裂解液效果的影响。 B 、消化时间测试:烘箱 55℃****实验室目前所采用的样本消化方法。需查阅资料掌握 55℃过夜消化的原理,对过夜消化的具体时间应进行测试,如 4 小时,6 小时, 8 小时,10 小时,12 小时。每批可随机选择几个品系多份,烘箱 55℃分别消化 4 、6 、8、 10 、12 小时,最终的 PCR 产物电泳后进行对比,进行五次左右测试以确定烘箱 55℃消化 的最优时间。 C 、PCR 模板 DNA 浓度测试:****实验室提取 DNA 实际情况在 PCR 时 进行不同浓度测试,从而得到最适模板 DNA 浓度。 D 、扩增条带大小测试:实验室目前所用提取 DNA 方法最高可扩增出 1000bp 大小的 条带,所以需测试更大条带是否也可以用这种方法进行,如实验室内部可设计 2000bp 左 右条带的引物,进行 PCR 扩增,看最终是否有扩增产物,如此进行 5 次左右测试,以提高 基因型鉴定试剂盒的 PCR 扩增产物的大小。 E 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ②TBE 研发 A.DNA 的琼脂糖凝胶电泳测试:TBE 缓冲液是生物学中常使用的核酸电泳缓冲盐溶 液,主要用于 DNA 的琼脂糖凝胶电泳。TBE 的主要成分是 Tris-硼酸盐与 EDTA,缓冲能 力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于 1kb 的片段时分离效果好。按不同比例 调配 Tris-硼酸盐、EDTA ,形成不同配方的 TBE 缓冲液,然后进行 DNA 的琼脂糖凝胶电 泳测试。 B 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ③DNA Marker 研发 A 、引物设计:设计阳性细菌或病毒不同大小条带引物,如 100bp,200bp ,300bp 等, 设计完成的引物验证其是否可用。 B 、克隆:对不同阳性核酸进行克隆,并对克隆产物进行蓝白斑筛选,挑出单一白色菌落进行冻存,同时PCR检测克隆是否成功。 C 、阳性核酸 PCR 产物的混合及浓度调整:将克隆成功的阳性核酸的电泳产物混合到一起,各组分调整至合适浓度,以使混合液的电泳条带呈现出单一明亮均匀的条带。 D 、收集数据分析:对实验数据进行收集整理,优化得到最佳研发方案。 ****实验室的研发过程中会产生废气(实验有机废气)、废水(实验器具清洗废水、地面清洁废水、实验纯水制备废水、实验高温灭菌废水、员工办公废水、工衣清洗废水)、噪声(实验设备噪声)、固废(实验动物尸体包括器官、组织等)、实验废一次性耗材、实验废液、实验纯水制备废RO膜、实验废培养基、实验器具首次清洗及二次清洗废水)。 (3)体外培育试验区体外培育试验流程(普通试验区) ①特定疾病小白鼠(原料)外购及饲养:根据体外培育试验的需求购买的特定疾病小白鼠,该特定疾病具有遗传性和非传染性,经过基****实验室进行)、微生****实验室进行)合格后,分笼饲养在特定疾病小白鼠暂存区,特定疾病小白鼠暂存区的饲养环境为屏障环境(符合国家标准:GB14928-2010 实验动物环境及设施),其环境温度在 20-26℃ , 湿度在 40%~70% ,所有小白鼠均饲养在屏障设备内的独立通风饲 养系统(IVC)中。特定疾病小白鼠(原料)的饲养周期约为 60d ,平均每批次饲养约 822 只,一年饲养 5000 只。 ②特定疾病小白鼠体外培育试验:在不同培育条件下,将特定疾病小白鼠(原料)在 体外受精,将受精卵注入分笼饲养在体外培育试验区的健康母鼠(原料)体内(在体外培 育试验区的 IVF 间、操作间进行),使健康母鼠(原料)受孕并产下特定疾病小白鼠后代, 将健康母鼠(原料)产下的特定疾病小白鼠后代分笼饲养在体外培育试验区,并定期对特 定疾病小白鼠后代进行基****实验室进行)、微生****实验室 进行),经过不断的繁育及筛选,得到符合试验要求的特定疾病小白鼠后代。体外培育试验区的饲养环境为屏障环境(符合国家标准:GB14928-2010 实验动物环境及设施),其 环境温度在 20-26℃ , 湿度在 40%~70% ,所有小白鼠均饲养在屏障设备内的独立通风饲养 系统(IVC)中。健康母鼠(原料)、特定疾病小白鼠后代的饲养周期均约为 60d ,健康 母鼠(原料)平均每批次饲养约 3288 只、特定疾病小白鼠后代平均每批次饲养约 28768 只,一年饲养健康母鼠(原料)20000 只、一年饲养特定疾病小白鼠后代 175000 只。
环保设施或环保措施
环评文件及批复要求: 实际建设情况: 变动情况及原因: 是否属于重大变动: 是否重新报批环境影响报告书(表)文件:
喷淋除臭+脱水棉+一级活性炭吸附、污水处理站、危废暂存间喷淋除臭+脱水棉+一级活性炭吸附、污水处理站、危废暂存间
其他
环评文件及批复要求: 实际建设情况: 变动情况及原因: 是否属于重大变动: 是否重新报批环境影响报告书(表)文件:
落实地下水和土壤污染防治措施。落实《报告表》 中提出的分区防渗要求,危废暂存间、危化贮存间和污水处理 设施应采取重点防渗措施落实地下水和土壤污染防治措施。落实《报告表》 中提出的分区防渗要求,危废暂存间、危化贮存间和污水处理 设施应采取重点防渗措施
3、污染物排放量
污染物 现有工程(已建成的) 本工程(本期建设的) 总体工程 总体工程(现有工程+本工程) 排放方式 实际排放量 实际排放量 许可排放量 “以新带老”削减量 区域平衡替代本工程削减量 实际排放总量 排放增减量 废水 水量 (万吨/年) COD(吨/年) 氨氮(吨/年) 总磷(吨/年) 总氮(吨/年) 废气 气量 (万立方米/年) 二氧化硫(吨/年) 氮氧化物(吨/年) 颗粒物(吨/年) 挥发性有机物(吨/年)
0 0.0872 0 0 0 0.087 0.087
0 0.044 0 0 0 0.044 0.044
0 0.0044 0 0 0 0.004 0.004
0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0 0 /
0 0 0 0 0 0 0 /
0 0 0 0 0 0 0 /
0 0 0 0 0 0 0 /
0 0.0518 0 0 0 0.052 0.052 /
4、环境保护设施落实情况
表1 水污染治理设施
序号 设施名称 执行标准 实际建设情况 监测情况 达标情况
1 污水处理站 《污水综合排放标准》(GB8978-1996)表4中三级标准 污水处理站 经检测:在验收监测的工况条件下,项目生活污水总排口所监测的项目中,pH最大值为7.7;SS、COD 、NH3-N、五日生化需氧量、总氯、阴离子表面活性剂、粪大肠菌群最大值分别为33mg/L、258mg/L、5.77mg/L、92.3mg/L、3.3mg/L、8.34mg/L、3500MPN/L均达到《污水综合排放标准》(GB8978-1996)表4中三级标准要求。NH3-N值低于城镇污水管网纳管标准45mg/L。
表2 大气污染治理设施
序号 设施名称 执行标准 实际建设情况 监测情况 达标情况
1 喷淋除臭+脱水棉+一级活性炭吸附装置 《恶臭污染物排放标准》(GB14554-93)表2排放限值;《大气污染物综合排放标准》(GB 16297-1996)表2中排放浓度限值; 喷淋除臭+脱水棉+一级活性炭吸附装置 经检测:在验收监测的工况条件下,项目无组织废气氨、硫化氢、臭气浓度、非甲烷总烃浓度排放最大浓度值分别为0.16 mg/m3、0.013mg/m3、<10(无量纲)、1.51mg/m3。符合《恶臭污染物排放标准》(GB14554-93)表2无组织排放限值;非甲烷总烃排放符合《大气污染物综合排放标准》(GB 16297-1996)表2中无组织排放浓度限值。 经检测:在验收监测的工况条件下,项目有组织废气氨、硫化氢、臭气浓度、非甲烷总烃排放最大浓度值分别为2.87 mg/m3、0.08mg/m3、851(无量纲)、17.5 mg/m3符合《恶臭污染物排放标准》(GB14554-93)表2排放限值;非甲烷总烃排放符合《大气污染物综合排放标准》(GB 16297-1996)表2中有组织排放浓度限值。
表3 噪声治理设施
序号 设施名称 执行标准 实际建设情况 监测情况 达标情况
1 合理布局,选用低噪声设备、基础减振、建筑隔声 《工业企业厂界环境噪声排放标准》(GB12348-2008)2类标准 合理布局,选用低噪声设备、基础减振、建筑隔声 经检测:在验收监测的工况条件下,项目厂界东外 1m 处、厂界南外 1m 处、厂界西外 1m 处、厂界北外 1m 处噪声昼间、夜间监测结果均符合《工业企业厂界环境噪声排放标准》(GB 12348-2008)2 类标准限值要求。
表4 地下水污染治理设施
序号 环评文件及批复要求 验收阶段落实情况 是否落实环评文件及批复要求
表5 固废治理设施
序号 环评文件及批复要求 验收阶段落实情况 是否落实环评文件及批复要求
1 严格落实固体废弃物污染防治措施。按“减量化、 **化、无害化”的处置原则落实各类固体废物的分类收集、处置和综合利用措施。生活垃圾交由环卫部门统一清运处置; 废包装袋、废垫料、实验纯水制备废RO 膜、试验区进风系统 废过滤器和饲养动物尸体等一般工业固废委外处置;实验废液、实验废一次性耗材、实验废培养基、实验动物尸体(包括 器官、一二次清洗废水、组织等)、实验废样本、废HEPA 过滤器、试验区排风系统废过滤器和废活性炭等危险废物委托有 资质单位处理。 项目应规范设置固体废物暂存场所,落实固体废物“三防”措施。一般工业固体废物临时贮存场所应满足《一般工业固体废物贮存和填埋污染控制标准》(GB18599-2020), 厂内废物应分类分区堆存,定期清运;危险废物临时贮存场所建设须符合《危险废物贮存污染控制标准》(GB18597-2001)及其修改单的要求。危险废物在处置过程中须严格执行《危险废物转移管理办法》的有关规定。 项目严格落实固体废弃物污染防治措施。按“减量化、 **化、无害化”的处置原则落实各类固体废物的分类收集、处置和综合利用措施。生活垃圾交由环卫部门统一清运处置; 废包装袋、废垫料、实验纯水制备废RO 膜、试验区进风系统废过滤器和饲养动物尸体等一般工业固废委外处置;实验废液、实验废一次性耗材、实验废培养基、实验动物尸体(包括器官、一二次清洗废水、组织等)、实验废样本、废HEPA 过滤器、试验区排风系统废过滤器和废活性炭等危险废物委托有 资质单位处理。 项目规范设置固体废物暂存场所,落实固体废物“三防”措施。一般工业固体废物临时贮存场所满足《一般工业固体废物贮存和填埋污染控制标准》(GB18599-2020), 厂内废物分类分区堆存,定期清运;危废暂存间建设符合《危险废物贮存污染控制标准》(GB 18597-2023)的要求。危险废物在处置过程中须严格执行《危险废物转移管理办法》的有关规定。
表6 生态保护设施
序号 环评文件及批复要求 验收阶段落实情况 是否落实环评文件及批复要求
表7 风险设施
序号 环评文件及批复要求 验收阶段落实情况 是否落实环评文件及批复要求
5、环境保护对策措施落实情况
依托工程
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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环保搬迁
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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区域削减
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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生态恢复、补偿或管理
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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功能置换
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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其他
环评文件及批复要求: 验收阶段落实情况: 是否落实环评文件及批复要求:
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6、工程建设对项目周边环境的影响
地表水是否达到验收执行标准: 地下水是否达到验收执行标准: 环境空气是否达到验收执行标准: 土壤是否达到验收执行标准: 海水是否达到验收执行标准: 敏感点噪声是否达到验收执行标准:
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7、验收结论
序号 根据《建设项目竣工环境保护验收暂行办法》有关规定,请核实该项目是否存在下列情形:
1 未按环境影响报告书(表)及其审批部门审批决定要求建设或落实环境保护设施,或者环境保护设施未能与主体工程同时投产使用
2 污染物排放不符合国家和地方相关标准、环境影响报告书(表)及其审批部门审批决定或者主要污染物总量指标控制要求
3 环境影响报告书(表)经批准后,该建设项目的性质、规模、地点、采用的生产工艺或者防治污染、防止生态破坏的措施发生重大变动,建设单位未重新报批环境影响报告书(表)或环境影响报告书(表)未经批准
4 建设过程中造成重大环境污染未治理完成,或者造成重大生态破坏未恢复
5 纳入排污许可管理的建设项目,无证排污或不按证排污
6 分期建设、分期投入生产或者使用的建设项目,其环境保护设施防治环境污染和生态破坏的能力不能满足主体工程需要
7 建设单位因该建设项目违反国家和地方环境保护法律法规受到处罚,被责令改正,尚未改正完成
8 验收报告的基础资料数据明显不实,内容存在重大缺项、遗漏,或者验收结论不明确、不合理
9 其他环境保护法律法规规章等规定不得通过环境保护验收
不存在上述情况
验收结论 合格
温馨提示
1.该项目指提供国家及各省发改委、环保局、规划局、住建委等部门进行的项目审批信息及进展,属于前期项目。
2.根据该项目的描述,可依据自身条件进行选择和跟进,避免错过。
3.即使该项目已建设完毕或暂缓建设,也可继续跟踪,项目可能还有其他相关后续工程与服务。
400-688-2000
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