类器官培养及转录组分析项目竞争性谈判（议标）采购公告

****拟采购类器官培养及转录组分析项目，现欢迎符合相关条件的供应商积极报名响应。

一、采购项目：

项目名称：类器官培养及转录组分析

项目编号：****

二、采购内容及要求：

采购清单

（1）细胞：

人肺成纤维细胞及THP-1细胞，2个细胞株

（2）抗体：

Anti-Prosurfactant蛋白C抗体，abcam；

Mouse/Rat CD31/PECAM-1 Affinity Purified Polyclonal Ab ，R D Systems；

CD45 Monoclonal Antibody (YAML501.4)，赛默飞；

alpha smooth muscle Actin Recombinant Antibody [SY02-64] - Mouse IgG1 (Chimeric)，共4支

具有肺血管和成纤维细胞及免疫细胞的肺类器官构建、鉴定及单细胞测序服务

技术要求

人肺成纤维细胞扩增培养：将冻存的人肺成纤维细胞复苏，接种于含10%胎牛血清的DMEM完全培养基中。置于37℃、5% CO培养箱中培养，每隔2天换液一次。待细胞融合度达到80%-90%时，使用胰蛋白酶消化传代，选取对数生长期的细胞用于后续实验。

THP-1细胞扩增与诱导培养：将THP-1人单核细胞悬浮培养于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中，维持细胞密度在3 10至8 10 cells/mL之间以保证细胞活性。在共培养前，可根据实验需求加入PMA（佛波酯）诱导其向巨噬细胞方向分化，或直接使用单核细胞进行共培养，以模拟肺部的免疫微环境。

血管化肺类器官的构建与细胞引入

本阶段采用人多能干细胞定向分化技术，结合共培养策略构建复杂的肺部组织模型。

iPSC起始分化：选取状态良好、核型正常的iPSC细胞，使用专用消化液消化成单细胞悬液。加入培养基重悬，接种于低吸附U型底96孔板中，诱导形成拟胚体。

定向诱导肺芽类器官：按时间序贯加入定型内胚层诱导培养基、前肠内胚层诱导培养基及肺类器官分支诱导培养基。在培养约15-20天左右，可获得肺芽类器官。

功能性细胞引入：在肺芽类器官形成的关键窗口期（或基质胶包埋阶段），将预处理好的人肺成纤维细胞与THP-1细胞按特定比例（如上皮:间质:免疫 = 10:1:1）混合，通过显微注射或直接共接种的方式引入类器官体系中。

成熟化培养：继续在气-液界面或基质胶中培养，促使类器官进一步囊性化、血管化，并形成包含上皮、血管、成纤维细胞及免疫细胞的复杂微环境。

多重免疫荧光鉴定与成像

为了验证类器官的细胞组成及结构特征，实验终点将采用多重免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜技术进行鉴定。

样本制备：收集各组血管肺类器官，经4%多聚甲醛固定、蔗糖脱水后，进行OCT包埋并制备冷冻切片（厚度约8-10 m）。

多重免疫荧光染色：切片经透化、封闭后，孵育特异性抗体。目标抗体组合如下：

成纤维细胞标志物：Vimentin ，用于标记间质成分；

2型肺泡上皮细胞标志物：SFTPC，用于评估肺泡上皮的成熟度及功能；

血管内皮标志物：VE-Cadherin，用于验证血管网络的形成；

免疫细胞标志物：CD11b，用于示踪引入的THP-1源性细胞。

共聚焦成像：使用荧光二抗孵育后，DAPI复染细胞核。利用激光共聚焦显微镜进行Z轴层扫拍摄，通过多通道成像观察不同细胞类型的空间分布、共定位情况及类器官的整体架构，从而确认是否成功构建了具有血管网络及免疫微环境的肺类器官模型。

血管肺类器官纤维化模型及单细胞测序：

将构建好的血管肺类器官随机分为三组，具体处理如下：

正常对照组：类器官在标准培养条件下培养，给予等体积的溶剂处理，不添加任何矽尘颗粒，作为基线参考。

矽尘组：向培养基中加入常规微米级二氧化硅颗粒，模拟传统工业环境下的粉尘暴露情况。

纳米矽尘组：向培养基中加入纳米级二氧化硅颗粒。鉴于纳米材料具有更大的比表面积和更强的穿透力，该组旨在探究纳米尺度下的矽尘是否具有更强的细胞毒性及促纤维化能力。

实验将在预定的时间点（实验终点）结束。届时，将收集各组类器官样本，利用酶消化法将其解离为单细胞悬液。为了保证数据的统计学意义和生物学重复性，每组设置3个平行样本。随后，利用单细胞转录组测序技术对样本进行深度分析。相较于传统的大批量测序，单细胞测序能够以单细胞分辨率解析类器官中不同细胞亚群（如不同状态的成纤维细胞、巨噬细胞极化状态、上皮细胞损伤情况）的基因表达谱变化。

供货周期：类器官构建及鉴定周期预计1.5-2.5个月；单细胞测序周期预计1个月。

本项目最高限价为：7.8万元。

供应商资质要求：无

三、报价人资格要求：

参加本次采购活动除应当符合《****政府采购法》第二十二条的规定外，还必须具备以下条件：

1、****商行****机关注册并经国、地税登记的法人单位，有能力独立完成招标项目要求的技术及服务，且具有良好的财务状况和商业信誉，营业执照复印件、法人身份证复印件、授权书、登记人身份证原件；

2、投标人如为被授权人，需提供投标单位为其连续3个月缴纳社保证明（不含投标当月），****公司法定代表人，无需提供社保证明；

3、近三年未被列入信用中国网站（www.****.cn） 失信被执行人查询名单 、 重大税收违法案件当事人查询名单 。（需提供信用中国网站查询截图）

4、无违反法律、行政法规规定的其他条件；

5、本次招标不接受联合体投标；

6、报价人须是具有相关资质要求的合格供应商。

四、报名时间、地点及联系事项

1、响应时间：2026年7月21日至2025年7月27日，每天上午9：00至11:30，下午14：00至16:30（节假日除外）。

2、响应地址：**市金城路499号****；联系人：姚老师；联系电话：188****1952。

3、投标人将所需资格证明文件（营业执照及法人身份证复印件）加盖公章以电子****中心邮箱：****@qq.com。报名邮件以 公司名称全称+投标项目及编号 形式命名主题，并在邮箱正文处留注联系人及联系方式，否则不予审核。

4.审核结果，将通过报名邮箱告知，报名审核通过者将在报名邮箱中收到响应文件电子版。邮箱报名且通过审核后方可参与谈判，响应文件请密封后于开标当日由投标人携带至竞标现场。标书代写

五、成交方式：

按二次报价总价最低者中标的原则确定成交价格和供应商。

六、招标有关信息

谈判时间：2026年7月28日9:30。响应人须按要求按时携带法人身份证原件或授权委托人身份证原件及授权委托书、响应文件（密封并加盖公章）到达指定地点（****1楼1107招标评标室）等候参加谈判，如未能按时参加谈判，则视为自动放弃本次采购活动。标书代写

有关本次采购活动方面的问题,可来电咨询。

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2026年7月20日